環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑（枯草黑色變種芽孢菌片）

凡用環(huán)氧乙烷滅菌的一次性注射器等器材的滅菌效果檢測(cè)方法有生物指示劑檢測(cè)和環(huán)氧乙烷化學(xué)滅菌指示卡兩種方法。

環(huán)氧乙烷滅菌效果的生物指示劑為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)菌株枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372)。

特    性：

該菌為G蘭氏陽(yáng)性桿菌，極易形成芽孢，芽孢位于菌體中央，不膨大。芽孢染色為孔雀綠著色。在瓊脂平皿菌落呈棕色并隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)菌落有黑色素生成著色。

生物指示劑（ATCC9372）：                    染菌量：5×105－5×106cfu/片

抗力：流通蒸汽：100℃4min

環(huán)氧乙烷：600±30mg/L      溫度：54℃      相對(duì)濕度：60%±10%

                    存活時(shí)間≥7.8min                        死亡時(shí)間≤58min

                    D值為2.6－5.8min

使用方法：

        1、該芽孢菌片適用于環(huán)氧乙烷（包括微波、干熱）滅菌檢測(cè)。

        2、使用時(shí)將裝有菌片的小紙袋放在被滅菌的物品中心部位（每鍋放置菌片數(shù)按衛(wèi)生部規(guī)定）。

        3、滅菌后，在無(wú)菌操作下取出小紙袋中的菌片，投放到培養(yǎng)液中。同時(shí)將2片未經(jīng)滅菌的菌片分別投入2管培養(yǎng)液中作對(duì)照。

        4、37℃培養(yǎng)7天觀察結(jié)果，對(duì)照管呈渾濁；若滅菌后菌片培養(yǎng)液呈清亮、無(wú)渾濁，為陰性（－），表示滅菌徹底；如培養(yǎng)液呈渾濁，為陽(yáng)性（+），表示滅菌不徹底。

        5、當(dāng)出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果后，為確定是否為滅菌后接種操作過(guò)程中污染其他菌種時(shí)，可在無(wú)菌室內(nèi)取0.2ml懸液接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板用無(wú)菌L棒涂抹均勻，置37℃培養(yǎng)24h后，涂片顯微鏡下觀察菌落形態(tài)或做進(jìn)一步試驗(yàn)。

培養(yǎng)液成份和配制方法：

      1、成        分：  牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、蒸餾水1000ml。

          2、配制方法：

          （1）把各種成分溶解后，調(diào)解pH7.0－7.2，搖勻；

          （2）每管分裝5ml，經(jīng)121℃20min滅菌后，放4℃冰箱內(nèi)保存，備用。

注意事項(xiàng)：

      1、本生物指示劑應(yīng)保存在4℃冰箱內(nèi)，避免其它因素影響。   

          2、本生物指示劑在檢驗(yàn)時(shí)可按衛(wèi)生部“消毒技術(shù)規(guī)范”有關(guān)規(guī)定進(jìn)行。