一、逆轉錄病毒服務簡介逆轉錄病毒是一種RNA病毒，其最基本特征是：在生命過程中，該病毒有一個從RNA到DNA的逆轉錄過程。逆轉錄病毒在感染宿主細胞時，會將自身基因組及其攜帶的外源基因整合入宿主基因組中，因此可以介導外源基因穩定、長期的表達。逆轉錄病毒DNA的整合是病毒RNA復制的必經階段。只有當受感染的細胞處于細胞分裂期時，逆轉錄病毒的DNA基因組才能接觸到宿主細胞內的遺傳物質。因此，逆轉錄病毒只能在分裂中的細胞中復制。輝駿生物使用的逆轉錄病毒表達載體基于莫洛尼鼠白血病病毒(MMLV)，其基本骨架是pMXs，并帶有多種可選的篩選標記。逆轉錄病毒包裝細胞為Plat-E，其內含有病毒包裝組分，因此只需轉入單一的病毒表達載體即可包裝出攜帶外源基因的病毒顆粒，操作更加方便。但是需要注意的是，Plat-E包裝出的逆轉錄病毒只能感染攜帶Slc7a受體的細胞，因此僅適用于大鼠、小鼠的細胞系；若宿主細胞為其它物種的細胞，則需要首先用攜帶Slc7a受體基因的病毒感染該細胞系，使其攜帶Slc7a受體，然后再用帶有外源目的基因的病毒感染相應細胞系。 二、逆轉錄病毒表達系統的特點1>能將外源基因有效地整合入宿主染色體上，介導目的基因穩定、長期的表達；2>轉染效率高，目的基因整合到宿主細胞基因組內的幾率大大增加；3>可用于基因的過表達，誘導產生多潛能干(iPS)細胞系；4>建立穩轉細胞株的時間較常規真核表達載體更短，能大大縮短實驗周期、提高實驗效率。 三、逆轉錄病毒服務整體流程A.逆轉錄病毒載體的構建：將目的基因片段連接至逆轉錄病毒載體；B.逆轉錄病毒包裝：重組病毒質粒直接轉染Plat-E細胞進行病毒包裝，收集富含逆轉錄病毒顆粒的細胞上清液，濃縮后進行滴度測試，得到滴度為1×10⁶~1×10⁷ TU/mL的逆轉錄病毒液；C.穩轉細胞株的建立：分別使用實驗組和對照組逆轉錄病毒感染細胞，利用抗生素初步篩選穩定細胞株，細胞分選得到單克隆細胞株，建立實驗組和對照組的穩轉細胞株。                                                                 圖1逆轉錄病毒技術服務整體流程   四、逆轉錄病毒載體元件    輝駿生物的逆轉錄病毒載體如下，另外，客戶還可根據需要更換啟動子，熒光基因或抗性基因。                                  
                                                         圖2逆轉錄病毒載體元件示意圖 五、逆轉錄病毒技術服務項目 表1 逆轉錄病毒服務項目及內容分類服務編號項目名稱客戶提供服務描述基因過表達逆轉錄病毒服務FG301基因過表達逆轉錄病毒構建目標基因的模板構建載體FG302基因過表達逆轉錄病毒包裝套餐目標基因的模板(1)構建載體(2)逆轉錄病毒包裝FG303過表達穩轉細胞株構建套餐目標基因的模板(1)構建載體(2)逆轉錄病毒包裝(3)建立穩轉細胞株 特別提醒：（1）基因過表達逆轉錄病毒服務適用于目標基因長度為2000bp以下的片段，2000bp以上的請具體咨詢；（2）我公司亦可進行基因釣取和WB檢測服務，但費用不包含在總套餐之內，需根據實際情況收費；（3）我公司一般提供的病毒滴度在1×10⁶~1×10⁷ TU/mL之間，規格為1mL；（4）Plat-E包裝出的逆轉錄病毒只能感染攜帶Slc7a受體的細胞，因此只適用于大鼠、小鼠的細胞系。 六、實驗結果提交實驗結束后，我公司會提交完整的實驗結果，包括：1.客戶定制的相應載體、病毒液或穩轉細胞株；2.逆轉錄病毒液滴度測定報告單；3.逆轉錄病毒載體的測序結果和峰圖、引物序列、載體圖譜；4.全部實驗圖片；5.詳細實驗報告。 

七、實驗周期及收費標準：咨詢本公司