預期應用
去氫表雄酮(dehydroepiandrosterone, DHEA), 化學名為3β-羥基雄甾-5烯-17酮,是人體腎上腺與性腺分泌的一種C19類固醇素,具有雄性激素作用,可提高體內(nèi)的睪酮水平，近年來因發(fā)現(xiàn)其具有促進肝糖氧化、減少糖原異生和抑制腫瘤的作用，因此被添加到減肥類保健食品中。目前，去氫表雄酮和其他內(nèi)源性類固醇激素的濫用已成為一個嚴重的問題，目前已有含DHEA的保健食品出現(xiàn), 因此本試劑盒用于檢測減肥類保健食品中的去氫表雄酮。
 
 
實驗原理
本試劑盒為一種直接競爭ELISA試劑盒。在微孔條上預包被偶聯(lián)抗原；加入樣品或標準品，樣品或標準品中的去氫表雄酮與微孔條上預包被的偶聯(lián)抗原競爭結(jié)合酶標記的去氫表雄酮多克隆抗體，游離的酶標記抗體通過洗滌被出去；再加入顯色液，結(jié)合的酶標記抗體是無色的顯色液轉(zhuǎn)化為藍色，加入反應終止液后再轉(zhuǎn)化為黃鱔，在450nm處測量，樣品吸光值與樣品中的去氫表雄酮含量成負相關(guān)，通過標準曲線即可計算出樣品中去氫表雄酮含量。
 
 
試劑盒技術(shù)指標
檢測限：  0.1ppb
檢測范圍：0.1 ppb – 62.5ppb
 
 
交叉反應：
Androsterone（雄甾酮）         0.1%
Androstenedione(雄烯二酮)       0.25%
Etiocholanolone（本膽烷醇酮）   0.1%
Testosterone（睪丸酮）          0.01%
Cortisol（皮質(zhì)醇）              0.01%
Progesterone（孕酮）            0.25%
Estradiol（雌二醇）             0.01%
 
 
試劑盒組成及試劑配制 
1.         酶標板：96T/8孔
2.         標準品溶液：0ppb,0.1ppb,0.5ppb,2.5ppb,12.5ppb,62.5ppb（1ml/瓶）
3.         酶標記物液：    7ml/瓶。
4.         底物緩沖液：    7ml/瓶。 
5.         底物液：        7ml/瓶。
6.         終止液：        7ml/瓶
7.         20倍濃洗滌液：  50ml/瓶。
 
 
樣品前處理方法：
 
1. 膠囊類樣品：取片劑或膠囊試樣進行粉碎混勻，稱取0.1000g試劑（準確至0.001g）于離心管中，加入1ml甲醇使用超聲提取5min后以3000r/min離心3min。準確取0.1ml試樣定容至1ml，檢測時加入50微升進行檢測。 
2. 茶葉樣品：用研缽研碎茶葉樣品，稱取1g研碎的樣品，加入1ml甲醇，漩渦混勻5min后，放振蕩器上震蕩15min；3000r/min離心3min，轉(zhuǎn)移出上清，取0.1ml定容至1ml。取50μL進行分析。
3.血清樣品：將血清3000r/min離心3min，取上清50μL進行分析。